半制備液相色譜儀的開機與系統(tǒng)自檢流程解析
1.開機準(zhǔn)備與系統(tǒng)自檢?
電源啟動順序：先開啟計算機電源，待系統(tǒng)穩(wěn)定后依次啟動高壓輸液泵、柱溫箱、自動進樣器及檢測器，確保各模塊自檢完成。
軟件聯(lián)機：雙擊色譜工作站，輸入用戶權(quán)限并選擇對應(yīng)的色譜系統(tǒng)，建立儀器方法組。
2.流動相配制與儀器沖洗?
流動相選擇與過濾：根據(jù)樣品性質(zhì)配制流動相（需色譜級試劑），使用0.45μm或0.22μm濾膜過濾（有機相用有機濾膜，水相用水系濾膜）。
泵排氣泡：將泵頭吸濾頭浸入流動相，通過注射器抽液閥排空氣泡，設(shè)置流速3-5mL/min沖洗泵頭5分鐘，確保無氣泡殘留。
進樣針清洗：通過軟件控制自動進樣器進行多次操作，或手動用純甲醇沖洗注射器以去除氣泡。
3.色譜柱平衡與基線監(jiān)測?
平衡系統(tǒng)：設(shè)置初始流速和流動相比例，運行泵至壓力穩(wěn)定，通過工作站實時監(jiān)測基線，待基線平穩(wěn)后準(zhǔn)備進樣。
柱溫控制：若使用柱溫箱，需提前設(shè)置溫度（通常為室溫或根據(jù)方法要求），確保分離條件穩(wěn)定。
4.樣品進樣與分離?
進樣操作：將樣品溶解過濾后，通過自動進樣器或手動進樣閥注入樣品（典型進樣量0.1-2000μL），設(shè)置保留時間并啟動分離程序。
梯度洗脫：若需梯度分離，通過軟件設(shè)置溶劑比例變化程序，動態(tài)混合流動相以實現(xiàn)高效分離。
數(shù)據(jù)采集：檢測器實時采集信號（如紫外吸收或蒸發(fā)光散射信號），工作站生成色譜圖并記錄保留時間及峰面積數(shù)據(jù)。
5.關(guān)機與系統(tǒng)維護?
色譜柱清洗：
若流動相含緩沖鹽，先用高比例水（如90%水/10%有機相）沖洗1小時，再用純有機相（甲醇/乙腈）沖洗30分鐘，最后保存于純有機相中。
無緩沖鹽時，直接用有機相沖洗30分鐘。
儀器關(guān)機：停流速后關(guān)閉工作站，依次關(guān)閉檢測器、泵、柱溫箱及電源，最后關(guān)閉計算機。
管路維護：長期停用時，管路需充滿純甲醇以防止溶劑揮發(fā)或污染。
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